適正製造基準（GMP）が採用されている環境で使用される除菌剤は、一般的かつ想定内のバイオバーデンを許容レベルまで低減できることを実証するために、検証を受ける必要があります。

9月2004日の「FDA Aseptic Processing Guidance for Industry Sterile Drug Products Produced by AsepticProcessing - Current Good Manufacturing Practice（無菌処理 - 現行の適正製造基準によって製造される産業用無菌医薬品に関する FDA 無菌処理のガイダンス）」 には、「日常的に使用される消毒剤は、製造施設から回収された通常の微生物植物相に対して有効でなければならない^{」と記載されています1}。

さらに、EudraLex 第 4 巻。「欧州連合における医薬品に関する規則、附属書 1、2022年8月」は、次のように規定してます。「4.34 消毒プロセスは検証されるべきである。  検証試験では、使用される特定の方法、表面材料の種類、または正当化される場合は代表的な材料における消毒剤の適合性と有効性を実証し、調合された液剤の使用期限を裏付ける必要があります」²

エコラボ ライフサイエンスは2018年、Validex™ 除菌剤有効性プログラムを立ち上げました。Validex™ データパッケージは、医薬品クリーンルームで使用される除菌剤を評価するための明確で再現性のある試験方法を提供します。このプログラムは、全世界で使用できる業界に適した方法と受け入れ基準を確保するよう設計されています。次に、この分析法を用いて、関連するクリーンルームの微小植物と表面を用いた包括的なデータセットを作成しました。

Validex™ のアプローチは、クリーンルーム除菌剤のバリデーションプロセスに関して具体的なガイダンスを提供することにより、複雑さを低減し、医薬品メーカーの効率向上に役立ちます。

Validex™ の方法論は、標準「欧州規格」(EN) 法 EN 13697 の原則に基づいています。これは、欧州標準化委員会 (CEN - Comité Européen de Normalization) によって開発された数値化されている非多孔質表面試験 3 です。CEN 技術委員会 216 は、消毒剤と防腐剤の有効性を評価するための統一された基準と試験方法を作成します。

これらの「欧州基準」(EN) 法は、クリーンルーム用除菌剤のバリデーションにおいて、ヨーロッパおよび PIC/S 加盟国で広く使用され、認められていますが、医薬品業界向けに特別に設計されたものではありません。

これを説明するために、EN13697 は、クリーンルーム消毒剤の検証に一般的に使用され、間違いなく最も関連性の高い方法論のひとつである試験方法であり、実際に「食品、産業、家庭、および機関の分野で使用される化学消毒剤の活性」を実証することを目的としています。このような環境は通常、クリーンルーム環境で見られるものとは、汚れのレベル、バイオバーデンのレベル、微小植物のレベルが大きく異なります。

医薬品業界向けに設計された特定の試験方法がないため、Validex™ 分析法はこの必要性を考慮して開発され、クリーンルーム用消毒剤のバリデーションに適したパラメータと、米国薬局方第 1072 章「消毒剤および防腐剤」(USP<1072>)⁴ の基準を適用しました。また、Validex™ の開発では、EN 法や AOAC/ASTM など、地域によって異なる規格のばらつき（菌株、殺生物剤、接種物の量、試験表面サイズのばらつきなど）も考慮しています。Validex™ プログラムに関する詳しい情報は、クリーンルーム技術に関する2019年11月号の記事「Call for a global disinfectant standard（国際的な除菌剤基準の必要性）」⁵をご覧ください。

クリーンルームで使用される除菌剤については、エンドユーザーが検証するための規制要件がありますが、どの方法を使用すべきかについてのガイダンスはありません。多くのエンドユーザーは、適切に設計され堅牢であるため、標準的な EN 法の修正版を使用することを選択します。また、USP <1072> で規定されているような医薬品業界の要件を反映した受け入れ基準を使用することも選択しています。

除菌剤の有効性検証に修正版の基準を使用することは、規制当局に広く受け入れられているアプローチとして認められています。エコラボの Validex™ プログラム開発においても、同様のアプローチが採用されています。

Validex™ のリリース後、6 年間にわたりさまざまなライフサイエンス分野での導入を成功させてきたエコラボは、さらに除菌剤ワイプの評価を含むデータパッケージを開発しました。

クリーンルームで使用される除菌剤は通常、何らかのモップや拭き取りを使用して塗布されるため、試験方法に機械的作用（拭き取り）を組み込むことは重要です。2015年には、新しい方法 EN 16615：医療分野で使用されるワイプの^{機械的作用 6} による数値化された非多孔質表面試験が導入され、消毒剤の有効性とこの eUicacy に対する機械的作用の効果が実証されました。

2022年8月、EudraLex 第 .4 巻、付属書 1 の更新版が発行されました。これにより、エンドユーザーは除菌剤を「使用される特定の方法」で検証するよう指示されました。そのため、この方法はクリーンルーム用消毒剤のバリデーションに広く採用されています。

EN 16615 は2020年、欧州化学機関 (ECHA) の殺生物剤技術協定 v2.2⁷ に、モップがけと拭き取りによって実際に適用される消毒剤の有効性試験の推奨方法として含まれるようになりました。この承認にもかかわらず、EN 16615 規格は、主にモップの利用を評価するよう設計されており、この方法を使用するときにかかる圧力を模倣するために、重く標準化された加重 (2.4kg) を利用しています。加重（圧力）は、殺生物剤ワイプの有効性評価において評価される一般的な要因ではないため、拭き取り動作を評価するための Validex™ のさらなる開発でも、この要因を調査しました。分析法開発の結果、かかる圧力を上げると、観察される微生物の死滅レベルが上昇することがわかりました。そこで、手拭きを反映した、より軽く適切な重量が Validex™ 方式のために確立されました。この重量は、モップがけと拭き取りの両方の用例に活用できます。

前述したように、また他の EN 規格に沿って、EN 16615 は医薬品業界向けに特別に設計されていません。その結果、その標準的な方法論は、高い初期バイオバーデン（開始時の接種）を組み込んでおり、双方向の動きによる拭き取りを指示します。EN 16615 は、実世界の除菌剤の用途をよりよく代表するものと考えられていますが、クリーンルーム環境で一般的に使用されるベストプラクティスの利用法は、その方法論には組み込まれていません。

エコラボの新しいワイプ除菌剤バリデーション方法は、クリーンルーム環境向けに特別に設計されています。Validex™ の拭き取り方法は、クリーンルームにおけるベストプラクティスの用法（一方向の重複する拭き取り）を取り入れています。クリーンルーム技術をより適切に表すように設計された分析法開発において評価されるその他の要因には、ワイプの最適な折り畳み、層、圧力、浸潤の具合などがあります。エコラボの手法は、微生物の除去や移動、ならびに殺菌（logリダクション）を評価するためにも開発されました。

微生物の有効性評価と併せて、試験方法の妥当性を考慮することが重要です。有効性評価が効果的でなくなるよくある落とし穴のひとつは、試験方法の特定の段階が微生物の生存率と検出にどのように影響するかを実証できないことです。方法のバリデーションを裏付けることができなければ、検出された微生物のlogリダクションが殺生物性の有効性のみによるものなのか、それともこの結果に影響を与える可能性のある試験法自体の手順によるものなのかを常に保証できるとは限りません。

一例として、EN 標準や Validex™ を含むほとんどの試験方法では、表面に微生物を接種し、それを乾燥させてから殺生物剤を塗布します。この乾燥工程の影響を理解することは、目的のlogリダクションを実証するのに十分な生存可能な微生物が試験表面に残っていることを確認するだけでなく、その後に塗布される除菌剤の効果ではなく、このプロセスのみによって微生物が死滅しないようにするためにも重要です。

Validex™ では、有効で再現性のある試験を確実に実施するために、開始時の接種と乾燥条件のレベルを評価および開発しています。さらなる試験の有効性には、検証された接触時間を超えた時点で殺生物作用を止め、かつ試験する微生物に毒性作用を及ぼさないことができる中和剤の評価が含まれます。これらはすべて、Validex™ の開発において考慮されました。

Validex™ プログラムは、非機械的作用と機械的作用（拭き取り）試験の両方を組み合わせて、図 1.0 にまとめたように、クリーンルームのさまざまな一般的な表面と微小植物を使用した包括的なデータセットを提供します。